Чыпкаларды агым цитометриясында колдонуу.

(Flow cytometry, FCM) - бул боёлгон клетка маркерлеринин флуоресценция интенсивдүүлүгүн өлчөөчү клетка анализатору. Бул жалгыз клеткаларды талдоо жана сорттоо негизинде иштелип чыккан жогорку технологиялык технология. Ал клеткалардын өлчөмүн, ички түзүлүшүн, ДНКны, РНКны, белокторду, антигендерди жана башка физикалык же химиялык касиеттерин тез өлчөп, классификациялай алат жана бул классификациялардын жыйындысына негизделиши мүмкүн.

图片1

Агым цитометри негизинен төмөнкү беш бөлүктөн турат:

1 Агым камерасы жана суюктук системасы

2 Лазердик жарык булагы жана нурларды калыптандыруу системасы

3 Оптикалык система

4 Электроника, сактоо, дисплей жана талдоо системасы

5 Клеткаларды сорттоо системасы

图片2

Алардын ичинен лазердик жарык булагы жана нур түзүүчү системадагы лазердик дүүлүктүрүү агым цитометриясында флуоресценттик сигналдардын негизги өлчөөсү болуп саналат. Козголгон жарыктын интенсивдүүлүгү жана экспозиция убактысы флуоресценттик сигналдын интенсивдүүлүгүнө байланыштуу. Лазер бир толкун узундуктагы, жогорку интенсивдүү жана жогорку туруктуу жарыктандырууну камсыз кыла ала турган когеренттүү жарык булагы. Бул талаптарга жооп берүү үчүн идеалдуу дүүлүктүрүүчү жарык булагы болуп саналат.

图片3

Лазер булагы менен агым камерасынын ортосунда эки цилиндр формасындагы линзалар бар. Бул линзалар лазер булагынан бөлүнүп чыккан тегерек кесилиши бар лазер нурун кесилишинен кичине (22 мкм × 66 мкм) эллиптикалык нурга багыттайт. Бул эллиптикалык нурдун ичиндеги лазер энергиясы нормалдуу бөлүштүрүүгө ылайык бөлүштүрүлүп, лазерди аныктоо аймагынан өткөн клеткалар үчүн ырааттуу жарык интенсивдүүлүгүн камсыз кылат. Башка жагынан алып караганда, оптикалык система линзалар, тешикчелер жана чыпкалардын бир нече топтомдорунан турат, аларды болжол менен эки топко бөлүүгө болот: агым камерасынын өйдө жана ылдый агымы.

图片4

Агым камерасынын алдындагы оптикалык система линзадан жана тешиктен турат. Линзанын жана төөнөгүчтүн негизги милдети (көбүнчө эки линза жана тешик) лазер булагы чыгарган тегерек кесилиши бар лазер нурун кесилиши азыраак эллиптикалык нурга фокустоо болуп саналат. Бул лазер энергиясын нормалдуу бөлүштүрүүгө ылайык бөлүштүрөт, лазерди аныктоо аймагындагы клеткалар үчүн ырааттуу жарык интенсивдүүлүгүн камсыздайт жана адашкан жарыктын кийлигишүүсүн азайтат.

 

Чыпкалардын үч негизги түрү бар: 

1: Узак өтүүчү чыпка (LPF) - белгилүү бир мааниден жогору толкун узундуктары менен жарыкка гана жол берет.

2: Кыска өтүүчү чыпка (SPF) - белгилүү бир мааниден төмөн толкун узундуктары менен жарыктын өтүшүнө гана уруксат берет.

3: Өткөөл чыпка (BPF) - белгилүү бир толкун узундуктагы диапазондогу жарыктын өтүшүнө гана мүмкүндүк берет.

Фильтрлердин ар кандай комбинациялары флуоресценция сигналдарын ар кандай толкун узундуктарындагы жеке фотокөбөйтүүчү түтүкчөлөргө (PMTs) багыттай алат. Мисалы, PMT алдында жашыл флуоресценцияны (FITC) аныктоо үчүн чыпкалар LPF550 жана BPF525 болуп саналат. PMT алдында кызгылт сары-кызыл флуоресценцияны (PE) аныктоо үчүн колдонулган чыпкалар LPF600 жана BPF575 болуп саналат. PMT алдындагы кызыл флуоресценцияны (CY5) аныктоо үчүн чыпкалар LPF650 жана BPF675 болуп саналат.

图片5

Агым цитометриясы негизинен клеткаларды сорттоо үчүн колдонулат. Компьютердик технологиянын өнүгүшү менен, иммунологиянын өнүгүшү жана моноклоналдык антитело технологиясын ойлоп табуу, анын биологияда, медицинада, фармацияда жана башка тармактарда колдонулушу барган сайын кеңири жайылууда. Бул колдонмолор клетка динамикасын талдоо, клетка апоптозу, клетканы терүү, шишик диагностикасы, дары натыйжалуулугун талдоо ж.б.


Посттун убактысы: 2023-жылдын 21-сентябрына чейин